Чтобы решить эту проблему, группа ученых под руководством профессора Кимуры из Института инновационных исследований Токийского технологического института создала генетически закодированный зонд для визуализации живых клеток для чувствительного мониторинга внутриклеточной пространственно-временной динамики монометилирования H4K20 (H4K20me1). Зонд, называемый mintbody (специфичное для модификации внутриклеточное антитело), ??представляет собой одноцепочечный вариабельный фрагмент, помеченный флуоресцентным белком, который демонстрирует высокую специфичность к H4K20me1 по сравнению с ди- и триметилированием в живых дрожжах, клетках млекопитающих и даже многоклеточных организмах.
H4K20me1, скорее всего, связан с плотной упаковкой избыточной (инактивированной) женской Х-хромосомы (Xi) в гетерохроматин. На модели круглого червя Caenorhabditis elegans профессор Кимура и его коллеги показали, что H4K20me1-mintbody можно использовать для мониторинга изменений в H4K20me1 в течение клеточного цикла и локализации Х-хромосом с дозовой компенсацией без нарушения функции клеток.
Таким образом, новое мятное тело может преодолеть проблемы, связанные с визуализацией и отслеживанием модификаций гистонов непосредственно в живых клетках.Это исследование также выявило ключевые аминокислоты, ответственные за конформационную стабильность, растворимость и, следовательно, функциональные характеристики H4K20me1-mintbody, с использованием рентгеновской кристаллографии и генетического анализа.
Таким образом, было сформулировано возможное решение существующей проблемы ограниченной растворимости внутриклеточно экспрессируемых фрагментов антител из-за аберрантной укладки в цитоплазме, которая ограничивает их использование.В будущем разработка дополнительных мятных тел, специфичных для различных посттрансляционных модификаций гистонов, будет способствовать идентификации регуляторных механизмов, которые контролируют эпигенетические модификации.