Согласно отчету The Journal of Molecular Diagnostics, анализ посева амилоида по времени позволяет достичь или превосходит чувствительность доступных в настоящее время тестов на трансмиссивные губчатые энцефалопатии.Трансмиссивные губчатые энцефалопатии (TSE) или прионные заболевания — это семейство редких прогрессирующих нейродегенеративных заболеваний, поражающих как людей, так и животных. Надзор за TSE важен для общественного здравоохранения и безопасности пищевых продуктов, поскольку TSE могут передаваться от животных к человеку, как это видно на примере распространения коровьего бешенства или губчатой ??энцефалопатии крупного рогатого скота (BSE). В исследовании, опубликованном в «Журнале молекулярной диагностики», описывается расширенный анализ, который предлагает лучшую чувствительность, чем доступные в настоящее время тесты, для обнаружения прионной болезни, поражающей лосей.
«Значение TSE для здоровья человека не было полностью осознано до тех пор, пока в годы после вспышки BSE в Соединенном Королевстве не были обнаружены случаи варианта болезни Крейтцфельдта-Якоба (vCJD) у людей. Эти случаи vCJD были связаны с потреблением мясных продуктов, загрязненных прионами BSE », — пояснила ведущий исследователь Стефани Чуб, DVM, доктор философии, канадской справочной лаборатории BSE, Канадское агентство по инспекции пищевых продуктов, Лаборатория Летбриджа, Летбридж, Альберта (Канада). «В результате многие страны приняли программы надзора за TSE, направленные на искоренение TSE, связанных с домашним скотом».
Программы эпиднадзора полагаются на высокочувствительные методы диагностики для раннего выявления инфекций. Обращаясь к необходимости определения устойчивых аналитических критериев эффективности для анализов высева прионного амилоида (ASA), исследователи разработали метод измерения времени превращения прионного белка (из нормальной клеточной формы в прионную форму) с помощью комбинации статистических анализов для получения ASA, обнаруживающего прионы. с известной степенью уверенности. Они сравнили чувствительность новой методики анализа, анализа с определенным временем посева прионов (tASA), с другими доступными в настоящее время тестами (два биотеста на лабораторных грызунах и три коммерчески доступных экспресс-теста TSE).Образцы для испытаний были взяты из мозга лося, экспериментально инфицированного хронической болезнью истощения (CWD), прионной болезнью, которая поражает шейных позвонков (копытных жвачных млекопитающих из семейства оленьих).
Исследователи смогли определить четкие критерии отсечения, позволяющие определять TSE-положительные и TSE-отрицательные состояния. В отличие от экспресс-тестов TSE, ASA также могут обнаруживать и измерять инфекцию TSE в крови, слюне или моче. Это дало бы клинические преимущества, такие как возможность брать пробы крови вместо более инвазивной биопсии ткани и скрининг донорской крови на загрязнение.
«Мы обнаружили, что tASA был не менее чувствителен, чем два биоанализа на грызунах, и до 16 раз более чувствителен, чем три различных экспресс-теста TSE», — отметил ведущий автор Джон Г. Грей, магистр медицины, канадская справочная лаборатория по BSE, Канадское агентство по контролю пищевых продуктов. «Это исследование должно способствовать дальнейшему развитию ASA как признанных систем обнаружения прионов. Мы считаем, что эта методология представляет собой будущее прионной диагностики, особенно в отношении здоровья человека, например, при скрининге донорской крови ».
TASA — это метод in vitro, который имитирует предполагаемый механизм распространения прионов in vivo. Это анализ конверсии, в котором в качестве субстрата используется рекомбинантный прион-родственный белок и определяется конверсия по изменениям флуоресценции. В отчете описаны временные характеристики анализа, чтобы избежать ложноположительных результатов (30 часов) или ложноотрицательных результатов в слабоположительных образцах (48 часов), а также количество повторений, необходимое для адекватной чувствительности (2-12). .«Это исследование представляет собой важный первый шаг для диагностического протокола tASA с целью получения разрешения регулирующих органов на его использование в программах эпиднадзора за TSE, нацеленных на CWD у шейки матки», — прокомментировал известный авторитет Хольгер Вилле, доктор философии, из отдела биохимии и Центра прионов Университета Альберты. и болезни сворачивания белка в Эдмонтоне, Альберта (Канада). «Также потребуется дополнительная работа для точной настройки и тестирования tASA для обнаружения прионов в периферических органах и образцах окружающей среды, что представляет собой существенную неудовлетворенную потребность в отслеживании распространения прионов CWD среди цервид Северной Америки, а также в окружающей среде. ”Прионы представляют собой патогенные трансмиссивные патогенные агенты, которые вызывают аномальное сворачивание специфических нормальных клеточных белков. Поскольку эти белки сконцентрированы в тканях головного мозга, повреждение головного мозга характерно для прионных заболеваний.
Прионные болезни обычно быстро прогрессируют и связаны с высокой смертностью. Прионная болезнь возникает, когда нормальная клеточная форма прионного белка преобразуется или конформационно изменяется в форму заболевания. Как только форма болезни введена, она становится самовоспроизводящейся, поскольку она превращает нормальную форму в более частую форму болезни.
CWD в настоящее время распространяется по США и Канаде, также присутствует в Южной Корее и только что был диагностирован у первого северного оленя в Норвегии.