Команда, возглавляемая Тору Кондо из Института генетической медицины Университета Хоккайдо, разработала новый мощный метод, который делает именно это.Гены в клетках имеют свои собственные переключатели, называемые промоторами. Ген отключается или заглушается, когда его промотор метилирован. Команда фактически хотела включить выключенный ген.
Они объединили механизм репарации ДНК, называемый MMEJ (соединение концов, опосредованное микрогомологией), с CRISPR / Cas9. Они вырезали метилированный промотор с помощью CRISPR / Cas9, а затем вставили неметилированный промотор с MMEJ, заменив выключатель на выключатель.Ученые использовали этот инструмент на гене нервных клеток OLIG2 и гене эмбриональных стволовых клеток NANOG, чтобы проверить его эффективность в культивируемых клетках.
В течение пяти дней они обнаружили доказательства того, что гены сильно экспрессируются. Когда они включили OLIG2 в культивируемых стволовых клетках человека, клетки с высокой эффективностью дифференцировались в нейроны за семь дней.Ученые также обнаружили, что их инструмент редактирования можно использовать для активации других промоутеров с отключенным звуком.
Кроме того, они обнаружили, что система не вызывает нежелательных мутаций в других генах, не являющихся мишенями, в клетках. Этот инструмент обладает широким потенциалом для использования для управления экспрессией генов, создания генетических цепей или для конструирования судьбы клеток.