Болезнь, вызванная вирусом Эбола (БВВЭ), является тяжелым инфекционным заболеванием, вызываемым видами вируса Эбола. EBOV вызвала эпидемию в Западной Африке в 2013–2015 годах и привела как минимум к 24 000 предполагаемых случаев заболевания и 10 000 подтвержденным смертельным исходам.
Ранняя диагностика БВВЭ важна не только для реализации эффективных вмешательств, но и критически важна для предотвращения распространения инфекции. Однако диагностировать БВВЭ на ранней стадии особенно сложно. Эбола вызывает симптомы, наблюдаемые при многих других инфекциях, включая малярию, брюшной тиф и грипп, а у некоторых пациентов даже развилось заболевание без особых признаков и симптомов. Современные методы диагностики предполагаемой инфекции вирусом Эбола включают цепную реакцию полимеразы обратной транскрипции, иммуноферментный анализ с захватом антигена и ELISA на иммуноглобулин M и иммуноглобулин G.
В предыдущих исследованиях та же группа вместе с другими продемонстрировала, что микроРНК (миРНК), продуцируемые эукариотическими клетками и вирусами, присутствуют в крови человека в высокостабильных бесклеточных формах, и эти так называемые циркулирующие миРНК могут служить неинвазивными биомаркерами для ранняя диагностика различных заболеваний, в том числе вирусных. Поскольку для диагностики БВВЭ на ранней стадии недостаточно эффективных методов, Чжан пытается совершить прорыв, рассуждая о небольших некодирующих РНК, специфичных для ВЭБВ, которые можно обнаружить в крови человека.Было сообщено об обнадеживающем открытии, что группа экстраполировала предполагаемую последовательность miRNA-подобного фрагмента, кодируемого EVDV, используя принцип продукции miRNA у эукариот. Затем в клеточной среде проверяли существование и созревание предполагаемого miRNA-подобного фрагмента в присутствии клонированной пре-miR последовательности.
В сотрудничестве с Академией военных медицинских наук они дополнительно идентифицировали кодируемый вирусом Эбола miRNA-подобный фрагмент в сыворотке пациентов с БВВЭ с помощью qRT-PCR, Нозерн-блоттинга и ТА-клонирования / секвенирования. Поразительно, но последующие результаты показали, что этот miRNA-подобный фрагмент существовал в острой фазе, но исчезал в фазе восстановления выживших с БВВЭ. Этот miRNA-подобный фрагмент, имеющий большое клиническое значение, был обнаружен у пациентов с БВВЭ до развития виремии с детектируемой геномной РНК вируса Эбола, что позволяет предположить, что это более ранний биомаркер, чем геномная РНК, и может способствовать расширению диагностического окна для БВВЭ.
Ранняя диагностика имеет решающее значение для борьбы с эпидемией Эболы:1) Ранняя диагностика увеличивает шансы на выживание пациентов с БВВЭ. По оценкам, около 60% случаев заражения вирусом Эбола остаются недиагностированными в сообществе; в то время как 60-90% нелеченных пациентов с Эболой умирают, поддерживающая медицинская помощь может снизить этот показатель до менее 30%.
Даже среди пациентов, которым удалось прибыть в больницу для лечения, большинство умерло в течение 2 дней после поступления, поскольку для этих пациентов было слишком поздно получить надлежащее лечение от такого тяжелого заболевания.2) Ранняя диагностика помогает ограничить распространение и преднамеренное распространение EBOV.
По оценкам, каждый больной лихорадкой Эбола передает вирус примерно 1,8 дополнительным людям без эффективной изоляции, что приводит к экспоненциальному росту инфекций. Ранняя диагностика и изоляция могут снизить передачу вируса до уровня менее одного человека на каждый инфицированный случай, тем самым сводя к минимуму возможность передачи вируса другим людям.
В развитых странах хорошо зарекомендовавшая себя медицинская система позволяет быстро выявлять и изолировать потенциальных пациентов; однако в Западной Африке эффективное лечение не было принято вовремя, что привело к нынешней массовой вспышке Эболы. Таким образом, в регионе с хрупкими и недофинансируемыми системами здравоохранения ранняя диагностика особенно важна для сдерживания эпидемии.
Соответственно, идентифицированный в настоящее время miRNA-подобный фрагмент может функционировать как ранний биомаркер БВВЭ, чтобы расширить окно диагностики и уменьшить трудности при изоляции и лечении пациентов, у которых развиваются подозрительные симптомы. Что еще более важно, поскольку miRNA-подобный фрагмент EBOV является высококонсервативным, он может предсказывать и предотвращать вспышки Эболы в будущем, если Эбола возникнет снова.